通过PET成像测量奥拉帕尼/奥拉帕利的分布

　　Gouverneur的小组已经开发出了一系列新颖的放射性氟化反应，可以对其他具有挑战性的基序进行放射性标记。最重要的是，芳基频哪醇衍生的硼酸酯的铜介导的芳族亲核18F氟化作用使得能够获得使用替代方法难以获得的放射性配体。实际上，该方法有助于从适当保护的，稳定的，稳定的芳基硼酸酯前体中获得同位素同位素，18F标记的奥拉帕尼本身。在这里，我们证明，使用奥拉帕尼（奥拉帕利），可以在胰腺导管腺癌小鼠模型中通过PET成像测量奥拉帕尼的分布，摄取和PARP结合。此外，我们报告了使用18F-奥拉帕尼检测外照射后的DNA损伤反应及其与肿瘤缺氧的关系。

　　据我们所知，这项工作代表了18F-在奥拉帕尼的首次放射合成及其在PET成像中的体内翻译.PARP-1水平是在有限的细胞系选择中确定的使用蛋白质印迹，并通过免疫荧光显微镜检查确认。 STR分析用于鉴定所有细胞系。在这项研究中使用的CAPAN-1细胞与美国典型细胞保藏中心的描述不符。然而，通过蛋白质印迹和免疫组织化学证实了低PARP酶表达。通过将等分于24孔板中的细胞等分暴露于外部束辐射，确定细胞中18F-奥拉帕尼的摄取，让细胞恢复2， 24或48 h，然后将细胞与在奥拉帕尼（50 kBq）孵育30分钟。

　　报告的摄取量是通过二辛可宁酸测定法确定的每毫克从分离细胞中回收的总蛋白质中所添加总量的百分比。摄取的特异性是通过使用过量的冷的，未标记的奥拉帕尼或其他PARP抑制剂（(瑞卡帕布，拉唑帕尼）阻断在奥拉帕尼的结合位点来确定的。 所有动物程序均根据1986年《英国动物（科学程序）法》并获得当地伦理委员会批准。通过在BALB/cnu / nu动物的后侧皮下注射PSN-1或Capan-1细胞悬液产生肿瘤异种移植物或同种异体移植物。通过从供体动物中收获CaNT肿瘤并在野生型CBA / Carl小鼠的腹侧皮下注射肿瘤匀浆来生成CaNT异种移植物。

　　每只动物植入一个肿瘤。使用300 kV X射线设备对肿瘤进行辐射或假辐射。 静脉推注18F-奥拉帕尼后获得动态PET图像。注射后1 h进行生物分布研究，收集选定的组织。一些动物还被给予过量的冷的，未标记的奥拉帕尼以评估肿瘤摄取的特异性（0.5mg）。在淘汰前2小时，向其中一些动物注射了缺氧选择性标记物EF5。确定所选组织中18F摄取的量，并报告为每克组织注射剂量的百分比。在肿瘤切片上进行数字放射自显影。使用PMOD分析PET图像。 所有统计分析和非线性回归均使用GraphPad Prism进行。

　　测试数据的正态性并通过1-way ANOVA，Dunnet后测进行分析，以计算组之间差异的显着性以进行多次比较。至少一式三份获得所有数据，除非另有说明，结果均以平均值±SD表示。 18F-奥拉帕尼是通过受保护的硼频哪醇酯前体的铜介导的18F-氟脱硼作用制备的，活性产率为18％±3％，摩尔活性高达25.7 GBq /μmol。在奥拉帕尼的情况下，附加的初步筛选实验表明，未保护的硼酸酯将与18F-氟脱硼烷不相容，这可能是因为酞菁氮对铜络合物催化剂的干扰。如筛选实验所预测，分别带有N-甲基或N- [2-）乙氧基甲基]保护的受保护的硼酸酯底物已成功地进行了18F-氟脱硼作用。测试表明，用于该底物的18 F-氟脱硼的最佳催化剂为，而使用1,3-事实证明，二甲基-2-咪唑啉酮是导致最佳放射化学收率的溶剂。至关重要的是，可以将由于前体的原脱硼而产生的不需要的副产物与所需产物分离，从而可以分离纯标记产物。现在奥拉帕尼的价格是多少？在哪里购买？更多详情可咨询下方微信。