ALK靶向药克唑替尼/赛可瑞的突变作用

　　已经在多种癌症中鉴定出涉及NTRK家族的致癌融合基因，并且在临床试验中，有少数NTRK-TKIs对NTRK重排阳性的癌症有效。在那些临床试验中治疗的患者中已经鉴定出了几种抗NTRK-TKI的突变。此外，根据ENU诱变筛选，我们最近使用Ba/F3模型鉴定了多个NTRK-TKI耐药突变。因此，我们检查了DS-6051b对这些抗性突变的活性。因此，在耐恩替替尼的患者中鉴定出的六个NTRK1-TKI耐药突变中的五个突变的IC50 <100 nM。在克唑替尼（赛可瑞）的患者中也发现了一种G667C突变，它对DS-6051b有抗性。

　　值得注意的是，G595R突变与已知的溶剂前沿突变ALK-G1202R和ROS1-G2032R同源。 G667C突变位于DFG核心基序旁边。在先前的研究中，我们和其他人发现了多个耐克唑替尼的突变，例如ROS1中的L2026M网守，G2032R或D2033N突变。特别是，在克唑替尼难治的ROS1重排的肺癌患者中发现了S1986Y/F，为了检查针对这些耐克唑替尼的突变体的活性，使用Ba/F3-CD74-ROS1突变体模型体外测试了DS-6051b的活性，DS-6051b有效抑制了L1951R，L2026M，S1986F和G2032R突变体Ba的生长/ F3细胞，但失去了对D2033N突变细胞的抑制活性。

　　但是，如先前报道，D2033N对卡波替尼敏感。与克唑替尼，塞立替尼，氯雷替尼，恩替替尼或布列加替尼相比，DS-6051b根据细胞活力测定数据抑制CD74-ROS1-G2032R突变Ba/F3细胞中ROS1的自磷酸化。为了评估DS-6051b在肺癌细胞系模型，尤其是G2032R突变型ROS1重排肺癌中的功效，尝试建立ROS1融合阳性肺癌的体内模型。肺腺癌细胞系HCC78带有，但在皮下注射的小鼠中无法稳定生长。因此，在我们最近的研究中，我们使用了称为HCC78xe3细胞的可移植HCC78亚细胞系，该细胞系通过重复制作三遍小鼠皮下肿瘤来稳定地在小鼠皮下形成肿瘤。

　　然后，我们建立了SLC34A2-ROS1-WT和-G2032R突变型HCC78xe3细胞。首先，在体外3D培养条件下测试了SLC34A2-ROS1导入的HCC78xe3细胞对克唑替尼，洛来替尼，卡博替尼或DS-6051b的敏感性。 DS-6051b和卡博替尼以相似的浓度抑制WT和G2032R突变型HCC78xe3细胞的细胞生长。相反，克唑替尼和劳拉替尼对G2032R突变细胞的IC50比对WT细胞的IC50高得多。这些结果表明，DS-6051b对G2032R突变型肺癌细胞具有活性。接下来，我们检查了DS-6051b是否可以在患者来源的细胞系中抑制磷酸化ROS1。从具有G2032R突变的CD74-ROS1的克唑替尼难治性患者肿瘤中建立MGH047-4细胞。

　　正如预期的那样，DS-6051b抑制了MGH047-4细胞中的磷酸化ROS1，但不抑制克唑替尼和氯雷替尼。由于在克唑替尼难治性患者中普遍鉴定出G2032R突变，因此DS-6051b在体内使用评价了表达CD74-ROS1-WT或-G2032R的Ba / F3细胞。这些表达Ba / F3的表达CD74-ROS1的小鼠用不同剂量的DS-6051b处理，异种移植物中的肿瘤生长和磷酸化ROS1以剂量依赖性方式被抑制。 ≥30μg/kg的DS-6051b处理在野生型和G2032R突变型Ba/F3携带小鼠的小鼠中显示出快速的肿瘤消退，而没有严重的体重减轻。

　　另一方面，100μmg/kg的克唑替尼治疗仅在表达CD74-ROS1-WT的Ba / F3异种移植物中诱导肿瘤缩小，而在G2032R突变模型中则没有诱导肿瘤收缩。总的来说，尽管G2032R突变Ba/F3小鼠的恩替替尼或10μmg / kg洛雷替尼的总剂量不超过60μmg/kg，尽管较低剂量的恩佐替尼或劳拉替尼可以使表达CD74-ROS1-WT的小鼠完全缓解，但它们不会诱导肿瘤缩小Ba / F3异种移植物。此外，单次处理甚至在药物处理后24小时仍能保持对ROS1的抑制作用。还通过免疫印迹分析了用克唑替尼或DS-6051b治疗4天的Ba/F3-CD74-ROS1（WT或G2032R）异种移植肿瘤。如预期的那样，DS-6051b在体内几乎完全抑制了WT-和G2032R突变的CD74-ROS1的磷酸-ROS1。现在克唑替尼的价格是多少，在哪里购买？更多详情可咨询下方微信。