泰瑞沙/奥希替尼的耐药性

　　奥希替尼（泰瑞沙）是一种有效的第三代表皮生长因子受体（EGFR）酪氨酸激酶抑制剂（TKI），已在多个国家和地区被批准用于EGFR T790M突变阳性非小细胞肺癌（NSCLC）患者。尽管最初的肿瘤反应令人印象深刻，但耐药性的发展最终限制了该化合物的益处。对奥希替尼耐药的机制才刚刚开始出现，例如EGFR C797S和L718Q突变，BRAF V600E和PIK3CA E545K突变以及ERBB2和MET扩增。但是，仍然缺少全面的看法。在这项研究中，我们介绍了首例对奥希替尼产生抗药性并从头发现的中国非小细胞肺癌患者EGFR G796D突变是潜在的机制。我们的发现提供了对奥西替尼耐药机制的见解，并突出了耐药性发展过程中的肿瘤异质性和克隆进化。

　　表皮生长因子受体（EGFR）活化突变（例如，L858R和外显子19缺失）占亚洲[非小细胞肺癌（NSCLC）的情况下30-60％。NSCLC患者EGFR活化突变响应第一代和第二代EGFR酪氨酸激酶抑制剂（TKI）。然而，耐药性的发展必然与事件归因于二级EGFR T790M突变。奥希替尼是针对具有EGFR激活突变和T790M的NSCLC开发的口服，不可逆的，选择性突变的第三代EGFR-TKI 。在光环和AURA3研究，奥希替尼是肺癌患者T790M突变谁与EGFR-TKI的事先治疗过程中取得了进展非常活跃。间T790M阳性NSCLC患者的中位无进展生存期（PFS）与奥希替尼显著长于与铂治疗加培美曲塞（10.1VS4.4个月;危险比，0.30;P<0.001），和客观应答率（与铂类药物加培美曲塞联合用药相比，奥西替尼的ORR显着更好（71％比31％；优势比为5.39；P<0.001）。

　　一名56岁的女性，被诊断为IV期肺腺癌（T4N2M1b），具有包括大脑和骨骼在内的多处远处转移灶。她总共接受了2年零5个月的多系化疗，包括4个疗程的吉西他滨/顺铂和2个疗程的培美曲塞/卡铂。疾病进展后，她改用吉非替尼，在治疗1个月内显示出部分反应。在吉非替尼治疗后13个月，她复发了，并且从进行性原发病变的活检中检测到EGFR T790M突变。由于当时在中国市场上没有奥希替尼，因此通过了“指定患者使用”的特别批准，她成为中国首位接受奥希替尼的患者。治疗6周后，扫描显示部分反应。然而，她在奥希替尼治疗后约6.5个月出现全身性进行性疾病（PD），随后转为放疗。

　　为了了解患者246对奥希替尼耐药的潜在机制，我们从吉非替尼前，吉非替尼PD和奥希替尼PD三个时间点收集并分析了她的血浆样品。使用下一代面板测序，我们在吉非替尼前血浆样品中鉴定了EGFR L858R突变，突变等位基因频率（MAF）为4.28％。有趣的是，此时还检测到了EGFR G796D的低MAF（0.61％）。吉非替尼PD后，T790M出现MAF为1.85％，与组织测试结果一致。使用奥希替尼 PD时，L858R和T790M均无法检测到，但是G796D的MAF增至1.91％。作为对照，在全血中未检测到三种类型的突变。这些数据表明，G796D是一个从头突变，可能与对奥希替尼的抗性有关。L858R，T790M和G796D在治疗过程中的不同动力学也暗示G796D可能是独立于L858R和T790M的独立突变。

　　G796位于C797残基附近，其中奥希替尼与EGFR形成共价键。因此，我们假设G796D可以通过干扰奥希替尼-EGFR相互作用来驱动对奥希替尼的耐药性。确实，与奥希替尼结合的EGFR激酶结构域的结构建模表明，突变的D796残基的侧链会冲撞到奥希替尼的分子表面，导致空间和能量排斥，并导致结合亲和力的丧失。

　　为了证实G796D可以诱导对奥希替尼的耐药性，我们生成了带有各种EGFR突变体的Ba / F3细胞稳定系。不依赖IL3的生长试验表明，与L858R和L858R / T790M突变相比，G796D可能是轻度致癌的驱动因子。奥希替尼以30–40 nM的GI50抑制L858R或L858R / T790M系的生长，但G796D突变株的GI50增至1.5–2μM，变化约50倍。此外，高达1μM浓度的奥希替尼不会调节G796D突变株的p-EGFR水平及其下游p-AKT和p-ERK1 / 2水平。这些细胞功能结果表明，G796D突变赋予了对奥希替尼的抗性。微信扫描下方二维码了解更多：