乐伐替尼7080的抗肿瘤活性与血管评分高度相关

　　在研究中，我们测定了乐伐替尼对VEGFR1-3、FGFR1-3、RET和KIT的抑制活性(Ki)。乐伐替尼在体外抑制VEGF和fgf2驱动的HUVECs增殖和管状形成，在小鼠DAS试验中使用KP-1/VEGF和KP-1/FGF，血管生成是由过表达的血管生成因子诱导的。乐伐替尼显著抑制了KP-1/VEGF肿瘤的体内生长，通过VEGF驱动的血管生成增强，IHC分析显示MVD降低。乐伐替尼在1~100mg/kg的KP-1/VEGF模型中具有显著的抗肿瘤活性。这些数据表明乐伐替尼在高度vegf依赖的模型中有较宽的治疗窗口。乐伐替尼的抗肿瘤活性与血管评分(高MVD和低周细胞覆盖率的联合评分)高度相关，在由各种癌症类型组成的19个人类肿瘤异种移植模型中。　

　　在KP-1/VEGF的DAS试验中，乐伐替尼在1mg/kg和10mg/kg时均显示出显著的抗血管生成活性(降低MVD)。在10mg/kg时，乐伐替尼也可以抑制KP-1/FGFDAS检测中FGF驱动的血管生成。在DAS实验中，Sorafenib(100mg/kg)抑制VEGF驱动的血管生成，但没有抑制FGF驱动的体内血管生成，这表明在kp1/FGFDAS实验中，抑制VEGF信号通路不足以抑制FGF驱动的血管生成。FGF和VEGF协同[35]促进多步骤血管生成。在KP-1/FGFDAS模型中，即使是低水平的VEGF也可能促进FGF驱动的血管生成。由于乐伐替尼可以同时抑制VEGF和FGF信号，乐伐替尼可能有效地抑制FGF驱动的体内血管生成。　　

　　在FGFRs中，FGFR1和FGFR2可能对血管生成影响最大。在细胞检测中，索拉非尼对fgfr驱动的增殖(即IC50值为2μM)的影响小于乐伐替尼(IC50值为410nM)。细胞测定中sorafenib活性的降低可能导致在KP-1/FGF模型中体内抗血管生成活性的降低。VEGF-C通过VEGFR3信号参与淋巴管生成和淋巴转移，而干细胞因子(stemcellfactor，SCF)通过KIT信号参与血管生成因子。乐伐替尼通过抑制KIT和VEGFR3来抑制scf诱导的血管生成和vegf-c诱导的淋巴转移。乐伐替尼对多种分裂激酶家族的泛抑制活性可能有助于乐伐替尼的广谱抗肿瘤活性，该活性基于多种血管生成因子(VEGFA、SCF、VEGF-C和FGF)驱动的血管生成抑制。　　

　　血管评分是MVD和周细胞覆盖率评分的总和，用于分析肿瘤血管系统与肿瘤模型对乐伐替尼治疗的敏感性之间的关系。11个相对耐药模型中，只有一个模型(HMV-1)的血管评分高于8分，而敏感组的8个模型中有7个血管评分高于8分。这一结果表明，在临床前19例人类肿瘤异种移植模型中，乐伐替尼治疗后血管评分预测肿瘤收缩。在本研究中，我们使用α-SMA染色来测定周细胞的覆盖率。但αSMA是平滑肌细胞的标记物，在进一步的研究中，可能值得检测其他周细胞标记物，如NG-2，以确认周细胞在乐伐替尼治疗敏感性中的作用。　　

　　最近Smith等人报道，MVD和αSMA阳性百分率的免疫组化分析确定了肿瘤类型，肿瘤血管类型或间质血管类型作为肿瘤血管系统的表型。RCC、HCC、甲状腺癌的肿瘤血管类型有反应，但CRC、乳腺癌、前列腺癌的间质血管类型对单一抗vegf治疗有耐受性。研究可能会确认由MVD和周细胞覆盖率组成的血管评分，作为选择对抗血管生成治疗有反应的患者的潜在预测生物标志物。由于即使在每种癌症类型中，肿瘤血管系统也存在很大程度的异质性，血管评分与抗血管生成素治疗敏感性的关系需要在每种癌症类型中更大范围的肿瘤样本中进一步研究。　　

　　在人类肿瘤标本的免疫组化分析中，18种原发肿瘤类型中，肾脏肿瘤(肾细胞癌)的MVD最高，而肝脏肿瘤(主要是肝细胞癌(HCC))的周细胞覆盖率最低。RCC和胃肿瘤(多数为腺癌)的血管得分最高，为11分，其次是淋巴瘤和HCC，为10分，甲状腺(多数为乳头状甲状腺癌)和肺(非小细胞肺癌)为9分。RCC、HCC和甲状腺癌已被批准用于VEGFR2TKIs的治疗，如舒尼替尼(RCC)、索拉非尼(RCC，HCC)、帕唑帕尼(RCC)、阿西替尼(RCC)或万德塔尼(MTC)。在本研究中，结肠和乳腺肿瘤的血管评分较低。贝伐珠单抗被批准仅用于CRC和乳腺癌的细胞毒性药物联合治疗；regorafenib和aflibercept[41]联合细胞毒性药物也被批准用于CRC。血管评分在评估单药或联合抗-vegf治疗的适应症时可能有用。　　

　　我们测量59基因的信使rna表达水平与在异种移植肿瘤血管生成中存在通过关注rtk及其配体。高表皮生长因子受体和低PlGFmRNA表达水平与敏感组乐伐替尼（乐伐替尼7080）治疗，表皮生长因子受体表达水平高和KITLGmRNAFGF7、PDGFRA信使rna表达水平低与小ΔT/C。EGFR信号通路诱导VEGF表达，联合EGFR抑制剂和VEGFR2抑制剂的协同作用报道。在sTF试验中，我们通过使用VEGF和EGF刺激HUVEC，因为额外使用EGF更经常地诱导毛细血管样网络形成。除了诱导VEGF表达外，EGF可能还参与了与VEGF信号的交叉作用。详情请扫码咨询：