依鲁替尼/亿珂/对GBM的作用

　　背景：　　

　　胶质母细胞瘤(GBM)是成人中最常见和最具侵袭性的原发性脑肿瘤。依鲁替尼（亿珂）是一种布鲁顿酪氨酸激酶(BTK)抑制剂，是一种用于治疗多种癌症的新型抗癌药物。在本研究中，我们旨在确定依鲁替尼（亿珂）对GBM的作用。　　

　　方法：　　

　　通过细胞活力、菌落形成和5-乙基-2'-脱氧尿苷(EdU)测定细胞增殖。流式细胞仪检测细胞周期和凋亡情况。用伤口愈合试验和跨井迁移试验评价细胞迁移能力。通过ATG7特异性小干扰RNA转染抑制ATG7表达。通过使用表达组成活性Akt(CA-Akt)的质粒转染细胞，可以实现活性Akt蛋白的过表达。透射电镜观察细胞内自噬体的形成。免疫荧光和westernblot分析蛋白表达情况。采用裸鼠肿瘤异种移植和免疫组化方法观察依鲁替尼（亿珂）对体内肿瘤生长的影响。

　　

　　结果：　　

　　依鲁替尼（亿珂）抑制LN229和U87细胞的增殖和迁移，诱导细胞凋亡和自噬。Akt活性蛋白的过表达降低了依鲁替尼（亿珂）诱导的自噬，而通过LY294002抑制Akt则增强了依鲁替尼（亿珂）诱导的自噬。3-甲基ladenine(3MA)和Atg7靶向小干扰RNA(si-Atg7)特异性抑制自噬增强依鲁替尼（亿珂）在体外和体内的抗gbm作用。　　

　　结论：　　

　　我们的结果表明依鲁替尼（亿珂）具有显著的抗肿瘤作用，并通过Akt/mTOR信号通路诱导GBM细胞自噬。自噬抑制促进依鲁替尼（亿珂）在GBM中的抗肿瘤活性。我们的发现为研究抗癌药物联合自噬抑制剂对恶性胶质瘤的作用提供了重要的见解。　　

　　在目前的治疗方案下，GBM的不良预后要求开发新的治疗药物。在本研究中，我们探索了依鲁替尼（亿珂）在GBM中的潜在抗癌作用。我们的结果表明，依鲁替尼（亿珂）确实在GBM中具有显著的抗癌潜力。此外，我们还证实依鲁替尼（亿珂）通过靶向Akt/mTOR通路诱导自噬。最后，我们提供的证据表明，阻断自噬可以增强依鲁替尼（亿珂）在体外和体内对GBM的作用。　　

　　自噬通常被认为在生长因子停用或代谢应激(如伽玛辐射、有毒刺激物暴露和化疗)下促进癌症生存。这一过程不仅在肿瘤发生的不同阶段，而且在疾病发生过程中都发挥着重要作用，创造了促肿瘤发生的微环境。然而，在某些细胞环境中，有报道称自噬可能通过诱导自噬细胞死亡来抑制肿瘤的发生。因此，目前关于自噬在肿瘤发生中的观点是一把双刃剑，既可以作为肿瘤抑制因子也可以作为肿瘤启动子；这个问题正受到越来越多的科学关注。最近，许多癌症治疗在癌症表明，自噬可以激活和保护肿瘤细胞暴露于靶向治疗时，例如，费城染色体阳性细胞和甲磺酸伊马替尼，乳腺癌和曲妥珠单抗，前列腺癌和Src家族激酶抑制剂，和前列腺癌和蛋白酶体抑制剂。　　

　　自噬相关基因ATGs在自噬过程中起着几个不连续但连续的作用。在自噬诱导下，细胞质中合成的部分LC3(Atg8)-I(LC3-I)均匀转化为LC3-ii，与自噬体膜紧密结合，在细胞质中形成环状结构。LC3表达与GBM患者生存和性能状态呈正相关，而在性能评分正常的患者中，低LC3表达与[35]较好的生存相关。联合治疗GBM最有效的药物TMZ和自噬抑制剂[例如，自噬抑制剂]。在治疗方法的合理发展中，氯喹(CQ)及其类似物引起了人们的注意，目前正在进行作为GBM治疗的临床试验。　　

　　这些提示自噬可能被激活作为GBM治疗的细胞反应。在本研究中，我们通过TEM和免疫细胞化学证实了依鲁替尼（亿珂）可以诱导自噬。Westernblot分析显示，依鲁替尼（亿珂）以浓度和时间依赖的方式提高了两个独立的GBM癌细胞系LC3-II蛋白水平。因此，自噬可能确实作为GBM治疗的细胞反应而被激活。　　

　　自噬是一个复杂的过程，通过多种环境信号进行微调，这些信号包括营养信号、生长因子状态、能量感知、缺氧、氧化应激和感染。Ampk和mtor信号通路已被揭示为调节自噬的中央检查点。据报道，依鲁替尼（亿珂）通过抑制btk及其下游akt/mtor信号通路抑制gbm肿瘤发生。我们的结果显示依鲁替尼（亿珂）能抑制btk的激活和下游目标的磷酸化，包括aktmtor和p70s6k。　

　　越来越多的证据表明，对akt及其下游靶蛋白mtor和p70s6k的抑制有助于自噬的发生。在目前的研究中，组成性活性akt的过度表达显著降低了依鲁替尼（亿珂）诱导的自噬。相反，pi3k/akt/mtor信号通路抑制剂ly294002增强了依鲁替尼（亿珂）诱导的自噬。因此akt/mtor信号通路是调节依鲁替尼（亿珂）诱导的自噬的关键介质。Egfr信号转导异常、egfrviii突变体表达与pi3k/akt/mtor通路相互作用是gbm患者常见的现象，促进了生存和化疗耐药。高等人最近报道，依鲁替尼（亿珂）通过抑制egfr磷酸化，选择性地抑制突变的nsclc细胞的生长，包括t790m突变细胞和erlotinib耐药的h1975细胞。因此，依鲁替尼（亿珂）也可能沿rtk-pi3k-akt-mtor轴诱导自噬。　　

　　通过靶向pi3k-akt-mtor轴的成分来诱导细胞自噬在gbm中具有典型的细胞保护作用。联合使用抑制溶酶体蛋白酶活性的巴菲霉素a1或莫能菌素，与抑制mtor激酶的pi-103或ku-0063794，通过诱导细胞凋亡促进gbm细胞死亡。Pi3k/mtor/akt抑制剂pi-103和akt-1/2与溶体营养剂cq联合使用，增强gbm细胞死亡。另外，双重pi3k和mtor抑制剂nvpbez235联合使用cq诱导胶质瘤细胞凋亡。同样，自噬的抑制已被报道与酪氨酸激酶抑制剂(tki)协同作用，如厄洛替尼或伊马替尼，以增加对gbm细胞的细胞毒性作用。在目前的研究中，敲除atg7能显著促进依鲁替尼（亿珂）诱导的胶质瘤细胞凋亡。此外，我们还证实了3ma对自噬的阻断增强了依鲁替尼（亿珂）的体内抗肿瘤作用。依鲁替尼在老挝怎么卖？详情请扫码咨询：