奥拉帕尼靶向治疗的效果好吗

　　奥拉帕尼靶向治疗效果怎么样？有相关的实验吗？小编带大家了解一下。　　

　　奥拉帕尼抑制CC细胞系生长　　

　　为了评估PARP抑制剂对CC的作用，我们研究了奥拉帕尼在体外对9个主要CC细胞系生长的影响，采用流式细胞术，如本方法所述。在增加奥拉帕尼浓度的孵育72小时后，我们发现33%的CC株系的细胞增殖呈递增的剂量反应性下降，敏感组和耐药组的IC50值差异显著(p=0.0012)。　　

　　对奥拉帕尼的敏感性与PARP活性密切相关　　

　　为了更好地理解原发性CC子集对奥拉帕尼敏感性的机制，我们分析了所有9个CC细胞系中PARP和PAR的基础表达，以及它们的突变谱(即HRD)，如methods部分所定义的。没有一个被测试的CC细胞系显示出HRD。事实上，在9个CC细胞系中，基因杂合性损失(LOH)的结果范围在0-12.3%之间，低于最初ARIEL2截断值14%(以及当前修订的截断值16%)用于将肿瘤划分为HRD。c相比之下，用免疫印迹(也就是说，细胞溶解产物被加载在秩序从最敏感最耐CC基于IC50值之前获得的流cytometric-based化验)我们发现PARP活性的直接基础表达水平之间的相关性(PAR)和olaparib治疗的敏感性。事实上，在体外实验中，CVX5、CVX1和CVX3(即在3cc原代细胞系中，PARP亚型116和89kDa的PARP表达较高)一致证明了对奥拉帕尼暴露的较高敏感性。　　

　　沉默PARP-1引发对奥拉帕尼的抗性　　

　　为了进一步评估PARP-1活性和CC对奥拉帕尼敏感性之间的关系，我们用PARP-1siRNA和阴性siRNA对照瞬时转染CVX5细胞，如材料和方法部分所述。在奥拉帕尼治疗72小时后，通过基于流式细胞术的方法评估PARP-1siRNA和阴性对照siRNA转染的CVX5细胞的IC50值。q-realtimePCR验证了肿瘤细胞中PARP-1mRNA沉默的有效性。转染PARP-1siRNA从敏感的CVX5细胞对奥拉帕尼处理变得高度耐药(即IC50从8.69°M到513.2°M)(p=0.0063)。　　

　　奥拉帕尼诱导CC细胞凋亡呈剂量依赖性　　

　　为了更好地了解PARPi活性的机制，在收获用于AnnexinV/PI染色前，将CVX5暴露于浓度不断增加的奥拉帕尼溶液(0.15，1.5，3°M)中48小时。我们证明1.5××M和3××M剂量的奥拉帕尼分别能诱导18%-20%的细胞凋亡，还能诱导27.5%的细胞延迟凋亡(p<0.0001)。　　

　　奥拉帕尼敏感性与G2/M细胞周期阻滞有关　

　　接下来，我们检查了在奥拉帕尼治疗24小时后CVX5(即具有代表性的奥拉帕尼敏感CC细胞系)和CVX8(具有代表性的奥拉帕尼耐药CC细胞系)的细胞周期。从1.5°M开始，67.7%的CVX5细胞表现出G2/M细胞周期阻滞(与未处理细胞相比，为22.3%)(p=0.000061)。这一百分比在3风美奥拉帕尼剂量时增加(78.3%)(p=0.00005)。与此相反，在任何剂量的测试中，奥拉帕尼处理对CVX8细胞周期均无影响(G2-M未处理细胞为16.2%，G2-M处理后为13.5%)(p>0.05)。　　

　　奥拉帕尼对敏感CC的PARP抑制和诱捕　　

　　接下来，我们通过免疫印迹法分析了在不同时间点(24-48小时)暴露于不同剂量奥拉帕尼(0.15°M-1.5°M)后CVX5细胞中PARP-1和PAR的表达。在暴露于1.5大鼠奥拉帕尼后，两个时间点的PARP表达均增加，但在24小时或48小时，PARP-1mRNA表达水平无显著变化。在两种剂量的奥拉帕尼(0.15和1.5甲流M)中检测到PAR水平显著降低。　　

　　奥拉帕尼可在体内损害CVX5异种移植瘤的生长　　

　　通过建立cvx5cc初级细胞系的异种移植物来测定奥拉帕尼的体内效应。简单地说，在肿瘤达到目标大小后，将动物随机分成治疗组，按照材料和方法进行治疗。每周评估肿瘤大小，如果肿瘤坏死、体积达到1.5cm3或健康状况不佳，则处死小鼠。与对照剂相比，每日两次口服50mg/kg奥拉帕尼耐受良好，对体重没有明显影响(数据未显示)。接受奥拉帕尼治疗的小鼠的肿瘤生长速度明显慢于从第12天开始的vehiclecontrol(p=0.0017)。此外，治疗组的总生存时间显著延长(LogRankmanteland-coxtestp=0.008)。奥拉帕尼在老挝东盟多少钱一盒？详情请扫码咨询：