赛可瑞/克唑替尼增强KRAS突变型大肠癌的放射反应

　　C-Met在抗药性，肿瘤侵袭和转移中起着重要作用。在这项研究中，我们在耐西妥昔单抗，突变的KRAS驱动的结直肠癌细胞系中使用了c-Met的小分子抑制剂克唑替尼（赛可瑞），并评估了放射增敏作用。材料与方法：使用含有结直肠肿瘤的组织芯片研究KRAS突变与c-Met表达之间的关系。

　　对于体内研究中，我们使用了KRAS突变细胞系HCT116，DLD1和LoVo。进行菌落形成测定以评估克唑替尼和西妥昔单抗的作用。免疫印迹分析用于确定克唑替尼对c-Met和下游途径以及DNA损伤反应的影响。然后，我们选择非细胞毒性剂量的克唑替尼来评估放射治疗的克隆形成存活率。为了研究放射致敏的潜在机制，使用流式细胞仪进行了细胞周期分析。

　　结果：组织芯片分析表明，KRAS突变肿瘤具有活跃的c-Met信号传导。KRAS突变细胞系LoVo，HCT116和DLD1对西妥昔单抗耐药，但对克唑替尼敏感。用克唑替尼预处理放射增敏的LoVo，DLD1和HCT116细胞系24小时，增强比例分别为1.54、1.23和1.30。免疫印迹分析表明，克唑替尼阻断了辐射诱导的c-Met磷酸化并减弱了下游信号传导途径。细胞周期分析显示克唑替尼对G1的抑制作用最小。此外，克唑替尼完全阻断了HGF诱导的细胞迁移。结论：克唑替尼对c-Met的抑制作用有效地使耐西妥昔单抗的KRAS突变结肠直肠癌细胞系对辐射敏感。克唑替尼具有改善接受化学放射治疗的局部晚期直肠癌患者治疗效果的潜力。

　　尽管最近有进展，但结直肠癌仍然是与癌症有关的死亡的主要原因。手术切除是该疾病的主要治疗方法。然而，最近的研究表明，对新辅助疗法有完全反应的患者可能是器官保存的候选人。手术具有长期的影响，包括对某些患者进行永久性造口术，肠道和膀胱习惯的慢性变化以及性功能障碍。在涉及骨盆的其他疾病（例如肛门癌，膀胱癌，前列腺癌和宫颈癌）中，辐射通常用于器官保存。

　　不幸的是，对于直肠癌，化学放疗的完全缓解率仅为10％-15％，因此很少有患者适合这种方法。已尝试将几种药物与标准化学放疗疗法结合使用，以提高缓解率。EGFR抑制剂（包括西妥昔单抗）与KRAS野生型患者联合化疗时已显示出疗效。但是，结合EGFR抑制剂和化学放射疗法的临床试验并未证明完全缓解率提高，即使在KRAS野生型肿瘤患者中也是如此。非常需要针对该疾病开发更有效的化学放射疗法。

　　C-Met是一种受体酪氨酸激酶，可调节多种与癌症相关的过程。C-Met激活诱导侵袭性生长程序，其特征在于细胞扩散，细胞间解离，运动型表型获得，迁移和增殖。c-Met的主要配体是肝细胞生长因子（HGF）。在与HGF结合后，c-Met形成一个活性二聚体，该二聚体通过其激酶活性直接促进信号转导，并通过支架蛋白Gab1间接促进信号转导。C-Met可以通过多种机制在癌症中被激活，常见的是在转录水平上的过度表达。在一些疾病部位，c-Met的高表达是不良的预后因素。在结直肠癌中，高c-Met表达与转移性疾病的风险增加和患者（包括早期疾病的患者）的存活率降低相关。

　　在这项研究中，我们检查了克唑替尼的放射增敏潜力。克唑替尼是一种小分子抑制剂，经FDA批准用于表达EML4-ALK融合蛋白或ROS1的晚期非小细胞肺癌。克唑替尼是一种有效的c-Met抑制剂，该蛋白的IC50（11 nM）比ALK（24 nM）低。鉴于c-MET在结直肠癌中的重要作用，我们假设靶向该激酶将增强放射线的细胞毒性作用并改变放射线诱导的细胞过程，例如细胞迁移。微信扫描下方二维码了解更多：