赛可瑞/克唑替尼和厄洛替尼的协同作用

　　在非小细胞肺癌中，表皮生长因子受体（EGFR）或cMET扩增的致敏突变分别作为针对EGFR或cMET的靶向治疗的良好生物标志物。在这里，我们旨在确定这种不同的遗传背景将如何影响EGFR抑制剂埃洛替尼和cMET抑制剂克唑替尼（赛可瑞）之间的相互作用。为了阐明协同作用的机制，我们研究了药物对各种参数的影响，包括细胞周期停滞，迁移，蛋白质磷酸化，激酶活性，药物外排泵的表达，细胞内药物浓度和活细胞显微镜检查。

　　我们观察到了EBC-1，H1975和HCC827的加性效应，以及HCC827GR5细胞系的强协同作用。该细胞系是具有EGFR外显子19缺失的HCC827细胞的克隆，并已对EGFR抑制剂吉非替尼产生抗性，导致cMET扩增。值得注意的是，与亲本HCC827细胞系相比，HCC827GR5中克唑替尼的细胞内浓度明显更高。

　　此外，用pH敏感探针进行的活细胞显微镜检查显示，与HCC827细胞相比，在HCC827GR5中进行药物处理后，细胞质和溶酶体的pH差异反应。pH值的这种变化可能会影响药物溶酶体隔离的过程。这些结果使我们得出结论，溶酶体隔离与HCC827GR5细胞系对克唑替尼-厄洛替尼的强协同作用有关。

　　在非小细胞肺癌中，表皮生长因子受体（EGFR）或cMET扩增的致敏突变分别作为针对EGFR或cMET的靶向治疗的良好生物标志物。在这里，我们旨在确定这种不同的遗传背景将如何影响EGFR抑制剂埃洛替尼和cMET抑制剂克唑替尼之间的相互作用。遗传学特征和溶酶体功能似乎都有助于HCC827GR5细胞系中crizotinib和erlotinib之间的协同相互作用，还需要进行更多的研究来确定连接这些细胞特性的确切机制。

　　本研究支持厄洛替尼和克唑替尼在NSCLC细胞中的协同相互作用中遗传特性和溶酶体功能的潜在作用。通过评估具有EGFR外显子19缺失的HCC827细胞系和还具有cMET扩增作为对吉非替尼的耐药机制的HCC827GR5细胞，可以得出这一新发现。EGFR-TKI厄洛替尼和cMET-TKI crizotinib的联合治疗在HCC827GR5细胞中产生了非常强的协同作用。相反，在cMET扩增的EBC-1或EGFR突变的H1975（L858R + T790M）细胞系中未观察到协同作用。

　　cMET和EGFR的信号传导通路紧密缠绕在一起，这可能导致埃洛替尼和克唑替尼之间产生协同作用。但是，EGFR的野生型EBC-1细胞系具有cMET扩增，仅显示了该组合的加和作用。因此，激活的EGFR突变似乎对于协同作用至关重要。总而言之，这些数据促使我们专注于HCC827GR5细胞，并将所有实验与亲本HCC827细胞系进行了比较。

　　厄洛替尼和克唑替尼之间的协同作用也反映在伤口愈合试验中，只有这种组合才能抑制HCC827GR5细胞系中的细胞迁移。已证明cMET的激活可刺激细胞迁移，EGFR也是如此。然而，值得注意的是，具有两个像差的细胞系迁移速度是亲代细胞系的两倍，这反映在对照伤口闭合所需的时间上（16 vs. 8 hr）。

　　对sub-G1部分的分析也与在HCC827GR5细胞系中发现的协同作用相符，而在亲本细胞系中，厄洛替尼的作用要比联合作用稍强。此外，细胞周期分析显示，厄洛替尼后G1停滞和克唑替尼后G2 / M停滞，这与文献一致。但是，联合用药后，克唑替尼的作用显着，但较单一疗法后弱。微信扫描下方二维码了解更多：