ALK抑制剂克唑替尼/赛可瑞的局限性

　　对克唑替尼（赛可瑞）对100 mg / kg /天的局限性或短暂反应相反，用10 mg / kg /天的PF-06463922（5 mg / kg BID）进行治疗可导致肿瘤迅速（2-3周内）并持续完整所有异种移植物的治疗时间进行回归分析。 PF-06463922治疗停止后，通过观察和触诊进一步监测动物的肿瘤进展。经过10 mg / kg /，7.1周（Felix-PDX），5周（SH- SY5Y）和4周（NB-1643）。

　　因此，带有耐克唑替尼新的ALK F1174L突变的异种移植物对单药ALK抑制用PF-06463922表现出前所未有的抗肿瘤反应，而带有F1245C突变的PDX也表现出前所未有的抗肿瘤反应，这些反应对10 mg / kg的快速而完全的反应在图2中/ day PF-06463922 / day 中，我们还评估了Felix-PDX（F1245C）PDX和SH-SY5Y（F1174L）异种移植物中3 mg / kg / day（1.5 mg / kg BID）的较低剂量。如图S3A–B和表1B所示，较低的PF-06463922剂量仍然比33倍的克唑替尼有效。在SH-SY5Y异种移植物中，3 mg / kg /天导致在治疗6周内完全消退（10 mg / kg /天PF-06463922则为2-3周）。

　　较低剂量的PF-06463922导致Felix-PDX出现明显的生长延迟，在整个治疗过程中肿瘤仍可触及，约4周后几乎没有进一步的生长。相对于SH-SY5Y和Felix异种移植中的对照组和克唑替尼组，两种剂量水平的PF-06463922均可显着延长无事件生存期（EFS）。活性，我们使用免疫印迹法分析了用媒介物，PF-06463922或克唑替尼处理的NB1643异种移植物的肿瘤裂解物中的pALK水平。药物治疗3天后，最后一次给药后1小时，收获肿瘤。如图3所示，在PF-06463922治疗的小鼠的肿瘤中基本上检测不到pALK，而克唑替尼治疗的小鼠的肿瘤保留了显着的ALK磷酸化。

　　有趣的是，克唑替尼似乎可以抑制TKD激活环中Y1278处的ALK磷酸化，比Y1604更完全-后者位于受体的C末端尾部。相比之下，PF-06463922在10 mg / kg / day时几乎完全抑制了两个位点的磷酸化。因此，与其更有效地抑制ALK依赖性肿瘤的体内生长相一致，PF-06463922似乎比克唑替尼更有效地抑制了ALK磷酸化-即使每日剂量降低了10倍。为了比较PF-06463922和克唑替尼在范围更广的ALK驱动的肿瘤中，我们使用CellTiter-Glo发光细胞活力测定法评估了它们在体外抑制一系列细胞系生长的能力。如图4和表S1所示，在依赖R1275Q突变的ALK的神经母细胞瘤细胞系中测得的PF-06463922的IC50值比所测值低51倍和19倍（LAN-5）。

　　用于克唑替尼–自身约为310 nM。重要的是，由抗ALK的F1174L ALK变异驱动的细胞系的PF-06463922抑制作用的IC50值也低得多-落在12.7 nM至26.6 nM的范围内，比克里唑替尼的测量值低约30倍。由F1245C变体驱动的Felix细胞也观察到类似的差异。 IC50的微小差异（约3倍）似乎足以解释神经母细胞瘤中F1174L突变的ALK驱动的肿瘤和细胞系相对于R1275Q驱动的相对克唑替尼耐药性，总体效力更高PF-06463922的图谱似乎使这种差异不相关-因此，由F1174L变体驱动的肿瘤细胞系和异种移植物都对PF-06463922敏感。

　　对于F1245C变体似乎也是如此。由扩增的野生型ALK驱动的NB-1细胞也得到了类似的结果，克唑替尼和PF-06463922的IC50值分别为256 nM和5.2 nM。这项研究还得出了另外三个有趣的发现。首先，对于由EML4-ALK融合驱动的NCI-H3122肺癌细胞系，克唑替尼和PF-06463922的IC50值的差异甚至更大，表明完整受体中TKD的存在可能会稍微限制PF-06463922的效力。其次，与先前的研究一致，在不依赖ALK进行生长的细胞系中的毒性比克唑替尼低-与其高选择性一致。第三，在使用R1275Q，F1174L或F1245C的细胞系中，PF-06463922处理不会引起完全的生长抑制。现在克唑替尼的价格也是比较的昂贵，如果您有需要购买，更多详情可咨询下方微信。