奥希替尼AZD9291多少钱一盒

　　以往的研究表明，通过特异性小分子抑制剂抑制主要作用的激酶癌基因可以减弱糖酵解作用。我们希望评估奥希替尼对EGFRm肺癌细胞系糖酵解代谢的影响。在egfr突变系NCI-H1975和PC9中，奥希替尼（AZD9291）会损害乳酸的生成——糖酵解的标记物，而在egfr野生型系NCI-H460中对乳酸没有影响。这种效应是EGFR特异性的，因为吉非替尼可抑制PC9细胞的糖酵解，而对吉非替尼耐药的T790M+NCI-H1975细胞则无抑制作用，而这些细胞保留了EGFR活性。奥希替尼抑制乳酸分泌一组扩展的EGFRm行，除了NCI-H1650细胞，本质上是对表皮生长因子受体抑制剂包括奥希替尼，只有适度抑制S6磷酸化在回应奥希替尼尽管EGFR抑制。　　

　　总的来说，糖酵解抑制与平均奥希替尼IC50和S6磷酸化抑制呈显著的负相关。有趣的是，在未添加奥希替尼的情况下培养获得性奥希替尼耐药的NCI-H1975细胞系，在随后的奥希替尼处理后糖酵解没有变化，尽管EGFR受到了有效的抑制。类似的结果也出现在对奥希替尼耐药的PC9细胞衍生物中，奥希替尼治疗对乳酸分泌没有(PC9-azdr1和PC9-azdr2)或很少(PC9-azdr4)的影响。通过测定糖酵解过程中的第一步己糖激酶活性，我们证实了奥希替尼对乳酸的影响是由于糖酵解功能受损所致。

　　

　　我们看到奥希替尼敏感细胞显示减少己糖激酶活性药物治疗后，而NCI-H1975细胞与获得性耐奥希替尼没有改变己糖激酶活动针对EGFR抑制综合这些数据表明奥希替尼-resistant细胞依赖糖酵解的另一个途径中表皮生长因子受体的缺失。然而，t790m介导的对吉非替尼(PC9-IR4)或vandetinib(PC9-VanR)获得耐药的细胞在奥希替尼处理后显示乳酸分泌减弱，与它们对该药物的生长敏感性相一致。此外，奥希替尼处理后PC9-VanR细胞己糖激酶活性降低。　　

　　对奥希替尼（AZD9291）敏感的PC9细胞的基因表达分析显示，奥希替尼后糖酵解的几个关键调节因子下调。在一组奥希替尼敏感细胞系中，糖解作用基因在mRNA水平上被证实下调，在HCC827和PC9-VanR细胞中尤为明显，而耐奥希替尼的NCI-H1975细胞中，这组mRNA未出现显著下调。此外，24小时奥希替尼治疗PC9，PC9-VanRNCI-H1975细胞导致mRNA的表达显著增加硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)，糖酵解的负调节，这是证实蛋白质含量在奥希替尼-sensitive细胞系，但不是在耐药细胞。因此我们得出结论，抑制糖酵解与奥希替尼的生长抑制有关，并且获得性奥希替尼耐药细胞的糖酵解是egfr不依赖的。　　

　　由于奥希替尼有效地抑制敏感系的糖酵解，我们推测OxPhos抑制剂可能与奥希替尼协同抑制egfr突变系的生长。我们比较了加入和不加入0.1mMphenformin(近似IC50)时的奥希替尼的生长响应曲线。Phenformin对PC9和HCC827细胞系的奥希替尼急性敏感性没有影响，而对NCI-H1975细胞奥希替尼敏感性略有增加。相反，NCI-H1975细胞的敏感性等一系列OxPhos抑制剂苯乙双胍，二甲双胍，双胍丁双胍和湾87-2243小分子有效OxPhos抑制性能——被添加奥希替尼增强。　　

　　阻断OxPhos的ATP合酶抑制剂寡霉素能使NCI-H1975细胞对阻断糖酵解途径的葡萄糖类似物2-DG敏感，这一事实进一步证明了糖酵解和OxPhos共同抑制可损害EGFRm细胞的生长。因为奥希替尼未能抑制糖酵解在耐药细胞，我们假设他们会没有增加敏感度OxPhos抑制敏感线相比，确实没有显著增加灵敏度苯乙双胍、二甲双胍或湾-87-2243。此外，phenformin联合处理对耐药细胞奥希替尼敏感性无影响。当NCI-H1975、PC9和HCC827细胞单独或联合使用奥希替尼或phenformin处理时，奥希替尼有效地抑制ERK1/2的磷酸化，而添加phenformin不会改变ERK1/2的磷酸化。然而，奥希替尼/phenformin治疗对核糖体S6蛋白磷酸化的抑制比两种药物单独治疗更强。　

　　接下来，我们推测同时抑制糖酵解和OxPhos代谢可能会诱导EGFRm细胞凋亡。奥希替尼/苯乙双胍组合显著增加半胱天冬酶激活3/7的一个子集细胞系(NCI-H820、HCC827HCC2935和PC9-VanR)独自奥希替尼，我们观察到一个类似的模式当的一个子集，这些细胞系受到膜联蛋白V染色后复合治疗。我们观察到，在加入MEK抑制剂selumetinib后，caspase活性增加的细胞系(AZD6244，ry-142886)的比例相似，就像之前描述的一样，尽管这两组细胞系并没有完全重叠。　　

　　虽然在短期生长试验中，我们发现NCI-H1975细胞同时接受phenformin治疗后对奥希替尼的敏感性增加，但我们希望在一个更好地代表临床进展的模型中评估OxPhos抑制剂对获得奥希替尼耐药的影响。我们采用的是一种长期培养体系，细胞以低密度在多个孔中被镀，并培养[23]长时间。在本实验中，所有奥希替尼处理的NCI-H1975孔在电镀后第25天都达到耐药，而更敏感的细胞株耐药孔比例更低，中位耐药时间更长。然而，对所有被测的细胞系来说，phenformin以剂量依赖的方式延迟或阻止了奥希替尼耐药的发展。例如，在PC9细胞中，当30nM奥希替尼联合30′Mphenformin时，只有10%的孔(3/30)出现耐药，而使用奥希替尼单药治疗的孔)为97%。在奥希替尼的160nM处，60%的孔(18/30)达到confluence，加入phenformin后，confluence降低到17%(5/30)。　

　　同样，在NCI-H1975细胞中，100molMphenformin(单药治疗效果可忽略的剂量)阻断了对奥希替尼和CO-1686(另一种t790m靶向EGFR抑制剂)的耐药性)。相比之下，NCI-H1650细胞显示egfr不依赖糖酵解，与奥希替尼联合使用时，phenformin的作用不大，这支持了同时抑制糖酵解和OxPhos介导耐药性衰减的假设。此外，在NCI-H1975细胞中，联合奥希替尼和一组OxPhos抑制剂(二甲双胍、丁甲双胍、BAY87-2243和寡霉素)显示出显著抑制或消除耐药，除了二甲双胍在转化细胞中仅具有与其先前描述的低效相当的适度效果。最后，我们确定OxPhos抑制对抗性的影响是AMPK无关的，因为直接AMPK激活剂化合物991和5-氨基咪唑-4-羧酰胺核糖核苷酸(AICAR)不能改变奥希替尼抗性的动力学。奥希替尼多少钱一盒？很多患者都会咨询老挝康安医院这个问题，目前老挝的奥希替尼价格是在1000多一盒，详情请扫码咨询：