奥拉帕尼/奥拉帕利诱导FOXM1和HR修复基因的表达

　　奥拉帕尼（奥拉帕利）诱导FOXM1和HR修复基因的表达　　

　　为了确定FOXM1在奥拉帕尼（奥拉帕利）诱导的适应性细胞应答中的潜在作用，我们用奥拉帕尼（奥拉帕利）处理卵巢癌ES-2和OVCA420*，测定FOXM1、BRCA1和RAD51在不同时间点的表达。我们观察到奥拉帕尼（奥拉帕利）在6小时内诱导FOXM1的表达。除了FOXM1表达上调外，在奥拉帕尼（奥拉帕利）处理后3小时内还观察到FOXM1的核位置增加，这表明ofFOXM1通路被激活。

　　

　　随着FOXM1通路的激活，我们观察到这些细胞中BRCA1和rad51的表达增加。FOXM1的核定位增加，FOXM1与其靶基因BRCA1、RAD51、FANCF、RAD51D和FANCD2等启动子区域的结合在奥拉帕尼（奥拉帕利）处理后12小时和24小时增加。这些数据表明，FOXM1在卵巢癌细胞对奥拉帕尼（奥拉帕利）治疗的适应性细胞反应中发挥重要作用。　　

　　FOXM1在对奥拉帕尼（奥拉帕利）反应较弱的癌细胞中表达较高　　

　　为了确定FOXM1的表达与奥拉帕尼（奥拉帕利）敏感性的相关性，我们通过qRT-PCR、Westernblot分析和SRB分析来评估FOXM1的表达和奥拉帕尼（奥拉帕利）敏感性。尽管FOXM1的所有三种形式都得到了表达，FOXM1C转录本水平更好地反映蛋白表达。与这些结果相一致的是，对CancerGenomeAtlas卵巢癌数据集的分析表明，FOXM1C转录本是三种亚型中最丰富的，这与Tassi和同事的一份报告相一致。这些细胞系奥拉帕尼（奥拉帕利）敏感性的剂量-响应曲线表明，FOXM1高表达的OVCA420*和OV90对奥拉帕尼（奥拉帕利）的敏感性较低。综上所述，这些结果表明FOXM1在卵巢癌细胞奥拉帕尼（奥拉帕利）敏感性中的潜在作用。　　

　　FOXM1敲除可增强对奥拉帕尼（奥拉帕利）的敏感性　　

　　为了确定FOXM1的表达在多大程度上影响奥拉帕尼（奥拉帕利）敏感性，我们使用了两种不同的siRNAs来下调FOXM1的表达。尽管这两种siRNAs都下调了FOXM1转录的所有三种亚型，但FOXM1B更容易受到这些siRNAs的影响。有趣的是，FOXM1的表达在蛋白水平上显著降低，表明这些siRNAs也影响了FOXM1蛋白，这与某些siRNAs的翻译抑制一致。　　

　　SRB检测表明FOXM1表达降低的细胞对奥拉帕尼（奥拉帕利）明显更敏感。同样，我们观察到，在FOXM1下调的细胞中，使用4、10和25mol/L奥拉帕尼（奥拉帕利）处理的细胞与搅乱的对照siRNA。接下来，我们使用药理学手段抑制FOXM1的表达，并确定FOXM1的抑制在多大程度上增强了对奥拉帕尼（奥拉帕利）的敏感性。　　

　　Thiostrepton是一种FOXM1抑制剂，可下调FOXM1的表达。在三种不同的卵巢癌细胞系中，我们观察到在克隆试验中检测的浓度下硫代strepton和奥拉帕尼（奥拉帕利）之间的协同作用和SRB试验中温和的协同活性。同样，我们观察到硫strepton与奥拉帕尼（奥拉帕利）或卡铂在其他癌细胞系中的协同作用。总的来说，这些结果表明FOXM1抑制增强了对奥拉帕尼（奥拉帕利）和卡铂的敏感性。奥拉帕尼（奥拉帕利）去哪儿购买呢？详情请扫码咨询：