达克替尼/多泽润抑制脑肿瘤细胞系模型中的EGFR信号传导

　　配体结合后，EGFR受体形成同二聚体或异二聚体，导致细胞内酪氨酸激酶结构域激活。这继而激活下游信号传导级联反应，包括磷酸肌醇3-激酶，AKT和ERK1 / 2途径。为了检查达克替尼对胶质母细胞瘤，髓母细胞瘤和皮母细胞瘤细胞系中EGFR信号的影响，我们通过免疫印迹评估了EGFR的表达和/或磷酸化以及下游通路的成分。在U87.Luc2细胞中，可以用最小的磷酸化EGFR（Y1173）检测到全长EGFR，而在U87vIII.Luc2细胞中，全长EGFR和EGFRvIII都可以表达，而在媒介物处理的细胞中可以检测到磷酸化的EGFR（Y1173）。

　　在0.4-4μM的剂量范围内，用达克替尼（多泽润）治疗显着降低EGFRvIII磷酸化（Y1173）。还通过免疫荧光在体外暴露于达克替尼的U87vIII.Luc2细胞中观察到了EGFRvIII磷酸化的抑制作用。还评估了U87.Luc2和U87vIII.Luc2细胞中下游EGFR效应子AKT（S473）和ERK1 / 2（T202 / Y204）的磷酸化。相对于EGF刺激/ DMSO处理的对照，达克替尼治疗可降低两种激酶的磷酸化，表明胶质母细胞瘤细胞中受体活性和下游信号均受到抑制。类似地，在GBM6患者来源的胶质母细胞瘤细胞的短期培养中，该细胞还具有EGFR扩增和vIII介导的激活作用，达科替尼可有效阻断EGFR磷酸化以及下游AKT和ERK1 / 2激活。

　　达克替尼抑制胶质母细胞瘤，髓母细胞瘤和成骨细胞瘤细胞中的EGFR活性和下游信号传导。使用指定的抗体对（A）U87.GFP.Luc2和U87.vIII.Luc2（C）GBM6（D）Daoy.Luc2和（E）452.Luc2细胞进行免疫印迹分析。用增加浓度的达克替尼处理细胞，并如方法中所述收获蛋白质。用逆转录病毒转导U87MG胶质母细胞瘤细胞以驱动EGFRvIII，GFP和pacLuc2的表达。在不存在（DMSO）或存在达莫替尼的情况下培养细胞，并通过免疫荧光法检测磷酸化的EGFR（Y1173）（磷酸化EGFRvIII，橙色）。GFP染色（绿色）证实成功地转导了达克替尼处理的样品中的细胞。细胞核用DAPI（蓝色）复染。比例尺适用于所有图像。

　　达克替尼在小儿脑肿瘤细胞培养中的作用与这些数据一致。Dacomitinib在Daoy.Luc2髓母细胞瘤细胞系中有效抑制全长EGFR磷酸化和452.Luc2胚母细胞瘤细胞系。而且，在两种细胞系中AKT和ERK1 / 2磷酸化也显着降低。总体而言，这些数据表明达科替尼抑制多种脑肿瘤细胞系中的EGFR磷酸化，从而抑制小儿脑肿瘤细胞和成年胶质母细胞瘤细胞的下游通路。现在达克替尼的价格是多少？更多详情可咨询下方微信。